Budidaya pisang kapok selama ini sangat terpengaruh dengan adanya penyakit layu, baik yang disebabkan oleh pathogen bakteri Ralstonia solanacearum, maupun jamur Fusarium oxysporum. Beberapa cara pengendalian yang dilakukan masih belum dapat untuk menekan tingkat serangan penyakit layu ini, alternatif pengendalian dengan melakukan pencegahan menggunakan bibit pisang kapok kultur jaringan yang dipadukan pemberian agens hayati (Trichoderma spp.) Tujuan penelitian ini untuk mencegah serangan penyakit layu bakteri maupun jamur. Metode penelitian yang digunakan dengan menggunakan bibit yang bebas penyakit (Kultur Jaringan) yang ditanam dilahan bekas tanaman terserang dan pemberian perlakuan Trichoderma spp., dengan penambahan pupuk organik. Hasil penelitian menunjukkan perlakluan tersebut dapat menekan serangan penyakit layu sampai tingkat 85- 90%. Kata kunci : Penyakit Layu, Kultur Jaringan, Agens Hayati