Penelitian ini bertujuan mendapatkan data ilmiah terkait pengaruh perbedaan waktu operasi penangkapan siang dan malam terhadap hasil tangkapan ikan Rasbora argyrotaenia di hulu sungai Barito Kalimantan Selatan. Metode yang digunakan dalam penelitian ialah metode experimental fishing dengan melakukan operasi penangkapan sebanyak 32 trip penangkapan yakni 16 kali ulangan (trip) pada siang hari dan 16 kali ulangan (trip) malam hari dan untuk mengkonfirmasi signifikansi pengaruh perbedaan hasil tangkapan ikan di analisis dengan menggunakan analysis of variance (Anova). Hasil penelitian menunjukkan data jumlah hasil tangkapan ikan R. argyrotaenia selama penelitian untuk kelompok A (siang hari) sebanyak 28,9 Kg dengan rerata hasil tangkapan 1,8 Kg + 0,6, dan jumlah hasil tangkapan ikan untuk kelompok B (malam hari) sebanyak 19,3 Kg dengan rerata hasil tangkapan 1,2 Kg + 0,6. Hasil analisis Anova menunjukkan bahwa nilai Fhitung kelompok (77,143) > Ftabel kelompok 5% (4,54), kelompok yang berbeda (siang dan malam) berpengaruh nyata terhadap jumlah hasil tangkapan ikan R. argyrotaenia atau tolak H0. Nilai Fhitung perlakuan (23,962) > Ftabel perlakuan 5% (2,40), menunjukkan bahwa perlakuan yang berbeda berpengaruh nyata terhadap jumlah hasil tangkapan ikan R. argyrotaenia atau terima H1 dan tolak H0. Dan berdasarkan hal tersebut, disimpulkan bahwa perbedaan waktu operasi penangkapan ikan menyebabkan terjadi perbedaan hasil tangkapan ikan R. argyrotaenia yakni jumlah hasil tangkapan ikan R. argyrotaenia pada waktu operasi penangkapan siang hari lebih banyak dibandingkan pada waktu operasi malam hari.