Penelitian ini bertujuan untuk menyiapkan bibit pisang sehat yang telah diproteksi dengan agensia hayati sehingga meningkatkan ketahanan tanaman terhadap patogen, menurunkan populasi patogen tular tanah, dan mencegah serangan bakteri layu (Raistonia solanacearum) pada tanaman pisang di lapangan. Uji in vitro dilakukan di Laboratorium Fitopatologi Fakultas Pertanian Universitas Lambung Mangkurat, sedangkan uji in vivo dilaksanakan di Desa Sungkai Baru, Kecamatan Simpang Empat, Kabupaten Banjar. Pengujian in vitro antagonis terhadap bakteri layu dilakukan dengan metode uji biakan ganda, dan dievaluasi kemampuan antagonis menghambat patogen. Dari 7 isolat Pseudomonas berfluoresen yang diperoleh, 3 isolat efektif mengendalikan bakteri layu yaitu isolati solat PfB3, PfB4 PfB7. Hasil demplot (percontohan penanaman pisang) memperlihatkan bahwa pemberian endomikoriza Glomus sp., 3 isolat Pseudomonas berfluoresen spesifik lokasi (PfB3, PfB4 dan NB7), sawi pahit dan pupuk organik fermentasi plus mampu menahan infeksi patogen penyebab penyakit layu pisang di lapang.